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製品

キャンドルや石鹸作りに最適な純粋なサポシュニコビア・ディヴァリカタオイル。卸売りのディフューザー用エッセンシャルオイル。リードバーナー用。

簡単な説明:

 

2.1. SDEの準備

SDの根茎は、Hanherb Co.(韓国、九里)から乾燥ハーブとして購入した。植物材料は、韓国韓医学研究院(KIOM)のGo-Ya Choi博士によって分類学的に確認された。標本(番号2014 SDE-6)は、韓国標準薬草資源標本館に保管されている。SDの乾燥根茎(320 g)を70%エタノールで2回抽出(2時間還流)し、抽出液を減圧濃縮した。煎じ液を濾過し、凍結乾燥して4℃で保存した。粗原料からの乾燥抽出物の収率は48.13%(w/w)であった。

 

2.2. 定量高速液体クロマトグラフィー(HPLC)分析

クロマトグラフィー分析は、HPLCシステム(Waters Co.、Milford、MA、USA)とフォトダイオードアレイ検出器を用いて実施した。SDEのHPLC分析では、一次クロマトグラフィーは、O-グルコシルシミフギン標準品は韓国伝統医学産業振興院(韓国慶山市)から購入し、sec-O-グルコシルハマウドールおよび4′-O-β-D-グルコシル-5-Oメチルビサミノールは、当研究室で単離され、主にNMRおよびMSによるスペクトル分析によって同定された。

SDEサンプル(0.1 mg)を70%エタノール(10 mL)に溶解した。クロマトグラフィー分離は、XSelect HSS T3 C18カラム(4.6 × 250 mm、5μ移動相はアセトニトリル(A)と0.1%酢酸水溶液(B)からなり、流速は1.0 mL/minであった。多段階グラジエントプログラムは、5% A(0分)、5~20% A(0~10分)、20% A(10~23分)、20~65% A(23~40分)とした。検出波長は210~400 nmでスキャンし、254 nmで記録した。注入量は10.0 mL/minであった。μL. 3種類のクロモンの定量のための標準溶液は、最終濃度7.781 mg/mL(prim-O-グルコシルシミフギン)、31.125 mg/mL (4′-O-β-D-グルコシル-5-O-メチルビサミノール)、および31.125 mg/mL(sec-O-グルコシルハマウドール)をメタノールに溶解し、4℃で保存した。

2.3. 抗炎症活性の評価試験管内
2.3.1. 細胞培養およびサンプル処理

RAW 264.7細胞は、American Type Culture Collection(ATCC、マナサス、バージニア州、米国)から入手し、1%抗生物質と5.5%FBSを含むDMEM培地で培養した。細胞は37℃、5% CO2の加湿雰囲気下で培養した。細胞を刺激するために、培地を新鮮なDMEM培地に交換し、リポ多糖(LPS、Sigma-Aldrich Chemical Co.、セントルイス、ミズーリ州、米国)を1%添加した。μSDE(200または400)の存在下または非存在下でg/mLが添加された。μg/mL)をさらに24時間放置した。

2.3.2. 一酸化窒素(NO)、プロスタグランジンE2(PGE2)、腫瘍壊死因子-α(TNF-α)、およびインターロイキン-6(IL-6)産生

細胞をSDEで処理し、LPSで24時間刺激した。NO産生は、以前の研究[12炎症性サイトカインPGE2、TNF-αの分泌αIL-6は、製造元の指示に従ってELISAキット(R&Dシステムズ)を使用して測定した。SDEのNOおよびサイトカイン産生への影響は、Wallac EnVisionを使用して540 nmまたは450 nmで測定した。マイクロプレートリーダー(パーキンエルマー社製)。

2.4. 抗変形性関節症活性の評価生体内
2.4.1. 動物

オスのスプラーグ・ドーリーラット(生後7週齢)をサムタコ社(韓国、烏山)から購入し、12時間明暗サイクルで管理された条件下で飼育した。°Cと湿度%。ラットには実験用飼料と水が与えられた。自由にすべての実験手順は、米国国立衛生研究所(NIH)のガイドラインに準拠して実施され、大田大学(韓国、大田市)の動物実験倫理委員会によって承認されました。

2.4.2. ラットにおけるMIAによるOAの誘発

動物は研究開始前に無作為に治療群に割り当てられた(各グループあたり)。MIA溶液(3 mg/50μケタミンとキシラジンの混合液で麻酔をかけた状態で、0.9%生理食塩水Lを右膝関節内腔に直接注入した。ラットは無作為に4つのグループに分けられた:(1)MIAを注入しない生理食塩水グループ、(2)MIAを注入するMIAグループ、(3)MIAを注入するSDE(200 mg/kg)投与グループ、(4)MIAを注入するインドメタシン(IM)投与グループ(2 mg/kg)。ラットには、MIA注入の1週間前から4週間、SDEとIMを経口投与した。本研究で使用したSDEとIMの投与量は、以前の研究で使用されたものに基づいている[101314].

2.4.3. 後肢の荷重分布の測定

OA誘発後、後肢の荷重能力の元のバランスが崩れた。荷重耐性の変化を評価するために、インキャパシタンステスター(Linton instrumentation、ノーフォーク、英国)を使用した。ラットを慎重に測定チャンバーに入れた。後肢が及ぼす荷重を3秒間平均した。荷重分布比は、次の式で計算した:[右後肢の重量/(右後肢の重量 + 左後肢の重量)] × 100 [15].

2.4.4. 血清サイトカインレベルの測定

血液サンプルを4℃で1,500g、10分間遠心分離し、血清を採取して使用時まで-70℃で保存した。IL-1のレベルはβ、IL-6、TNF-α血清中のPGE2は、R&D Systems(米国ミネソタ州ミネアポリス)製のELISAキットを用いて、製造元の指示に従って測定した。

2.4.5. リアルタイム定量的RT-PCR分析

TRI試薬®(Sigma-Aldrich、米国ミズーリ州セントルイス)を用いて膝関節組織から総RNAを抽出し、cDNAに逆転写後、SYBRグリーン入りTM One Step RT PCRキット(Applied Biosystems、米国ニューヨーク州グランドアイランド)を用いてPCR増幅した。リアルタイム定量PCRは、Applied Biosystems 7500リアルタイムPCRシステム(Applied Biosystems、米国ニューヨーク州グランドアイランド)を用いて行った。プライマー配列およびプローブ配列は表に示す。1サンプルcDNAのアリコートと等量のGAPDH cDNAを、製造元の指示に従ってDNAポリメラーゼを含むTaqMan® Universal PCRマスターミックス(Applied Biosystems、Foster、CA、USA)で増幅した。PCR条件は、50℃で2分、94℃で10分、95℃で15秒、60℃で1分を40サイクルとした。ターゲット遺伝子の濃度は、製造元の指示に従って、比較Ct法(増幅曲線と閾値の交点における閾値サイクル数)を用いて決定した。


  • FOB価格:0.5~9,999米ドル/個
  • 最小注文数量:100個
  • 供給能力:月間10000個
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    商品タグ

    変形性関節症(OA)は、高齢者において最も頻繁にみられる筋骨格系の疾患であり、最も一般的な変性関節疾患である。1OAは、損傷、軟骨構造と機能の喪失、炎症促進経路と抗炎症経路の調節異常などが原因で起こる疾患です。23]。これは主に滑膜関節の関節軟骨と軟骨下骨に影響を与え、関節の機能不全を引き起こし、歩行や立位を含む荷重時に痛みを生じさせます。4].

    OAには治療法がなく、一度破壊された軟骨を修復することは非常に困難です。5治療の目標は、痛みを和らげ、関節の可動性を維持または改善し、関節の強度を高め、疾患による障害の影響を最小限に抑えることです。OAの薬物療法は、患者の関節機能と生活の質を向上させるために痛みを軽減することを目的としています。軟骨の破壊はOAの主な出来事ですが、コラーゲンの分解は炎症と関連してOAの不可逆的な進行を決定する根本的な出来事です。67抗炎症作用と軟骨保護作用を持つ治療法は、変形性関節症患者の痛みを軽減し、マトリックスの完全性を維持することが期待される。

    したがって、炎症を軽減することはOAの管理に有益である可能性が高い。最近の研究では、軟骨細胞の炎症やさらなる軟骨破壊を軽減するという点で、ハーブ資源がOAの進行に対して保護的な役割を果たしていることが示唆されている。これは、ハーブ資源が関節関連組織と相互作用する能力によって、関節痛の軽減につながるためである。8].

    根源Saposhnikovia divaricataシシキン(セリ科)は、韓国や中国で頭痛、痛み、炎症、関節炎の治療に伝統医学で広く用いられてきた。910]。Saposhnikovia divaricata(SD)には抗炎症作用、鎮痛作用、解熱作用、抗関節炎作用も含まれる[911]。最近の研究では、SDクロモン抽出物がコラーゲン誘発性関節炎のマウスモデルにおいて抗リウマチ性関節炎効果を有する可能性が示された[10];しかし、抗炎症作用および抗関節炎作用を裏付ける研究はほとんど行われていない。Saposhnikovia divaricata抽出物(SDE)。

    そこで本研究では、SDの70%エタノール抽出物の抗炎症作用および抗変形性関節症作用を検討した。まず、SDEの抗炎症効果を評価した。試験管内LPS誘導RAW 264.7細胞において。次に、モノヨード酢酸ナトリウム(MIA)誘導OAラットモデルにおいて、荷重分布、関節軟骨の変性、および炎症反応を評価することにより、SDEの抗変形性関節症効果を測定した。








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